Sisu
PCR on meetod, mida teadlased kasutavad DNA segmendi miljonite koopiate tegemiseks. Polümeerid - valgu ensüümi tüüp - aitavad luua uusi segmente. Teadlased kasutavad sageli PCR-is Taq-polümeraasi.
Ajalugu
Taq polümeraas pärineb Thermus aquaticus'e bakterist, mis elab termilistes vetes. Kary Mullis ja Fred Faloona arendasid 1980. aastate keskel PCR-i, kasutades algselt Escherichia coli polümeraasi, kuid teadlased hakkasid kiiresti kasutama Taq-i PCR-is, sest see oli kõrgematele temperatuuridele vastupidavam.
Funktsioon
PCR hõlmab denatureerimise, anniilimise ja replikatsiooni etappe, mida tavaliselt korratakse 20 kuni 30 korda. Denaturatsioon eraldab DNA topeltahela eraldatud ahelateks. Anniilimise etapis seonduvad praimerid kopeeritavatele DNA segmentidele. Taq polümeraas hakkab toimima replikatsiooni etapis: polümeraas koondab igast üksikust DNA ahelast, mis on tähistatud praimeriga, uue kaheahelalise ahela.
Kasu
DNA denatureerimiseks vajalikud kõrged temperatuurid hävitasid algselt PCR-is kasutatud E. coli polümeraasi, mis nõudis iga tsükli jaoks täiendava ensüümi lisamist. Taq polümeraas talub neid temperatuure, nii et teadlased saavad nüüd teha mitu PCR tsüklit automaatselt.
Kaalutlused
Taq polümeraasil on suhteliselt kõrge DNA kahekordistumise veamäär. Muudel kõrgematel temperatuuridel stabiilsed polümeraasid on madalamad veamäärad, kuid Taq on endiselt kõige usaldusväärsem ja mitmekülgsem.