Sisu
- Juhised
- Materjalide ettevalmistamine
- Spooride asetamine plaatidele
- Puhta kultuuri eraldamine
- Järglaste ettevalmistamine
- Aluspinna inokuleerimine seenekasvuks
- Kuidas
- Teade
- Mida sa vajad
Seene võib kasvatada eosed või koekultuurist. Spore kultuurid põhjustavad geneetiliselt erinevate seente populatsioone. See on kasulik uute tüvede eraldamisel ja katsetamisel. Seened on protseduurid liigispetsiifilised. Eeldatakse, et tootja teab, kuidas kasvatada huvipakkuvat seeni, eriti pärast piisavate järglaste saamist.
Juhised
Agaricuse seente kogumine (Fotod Ian Grant, Jason Hollinger)-
Valmistatakse 500–1000 ml MEA-d vastavalt tootja juhistele.
-
Asetage naatriumkloriidi lahus katseklaasidesse ja MEA Erlenmeyeri kolbidesse. Ärge täitke torusid ja viaale rohkem kui pooleldi ja katke veidi.
-
Steriliseerige naatriumkloriidi, MEA ja Petri tasside lahus (kui see ei ole steriilne) rõhukapis 121 ° C ja 1 atm 15 kuni 20 minutit.
-
Eemaldage MEA, naatriumkloriidi lahus ja Petri tassid surveplaadist ja lastakse jahtuda.
-
Kui MEA on piisavalt käideldud, kuid enne tahkestamist, tõstke kaas iga Petri tassist ettevaatlikult üles ja valage 10-20 ml sulatatud MEA-d.
-
Laske MEA ja naatriumkloriidi plaatidel jahtuda toatemperatuurini.
Materjalide ettevalmistamine
-
Steriliseerige konks alkoholilampis. Laske traadil soojeneda, kuni see muutub punaseks, seejärel laske sellel jahtuda 5 sekundit.
-
Kastke konks naatriumkloriidi lahusesse, et koguda tilk vedelikku. Lõigake tilk väikese ala peale spooride (või muude spooride allikate) mulje, et tekitada vedeliku / spoori segu. Korrake seda protsessi mitu korda, steriliseerides konksu.
-
Kasta konks naatriumkloriidi ja spooride suspensioonile, et spoorid koguda.
-
Tõstke agariplaadi kaas lihtsalt üles, et võimaldada juurdepääsu konksule.
-
Eemaldage spooride suspensioon konksust agari pinnale ja võtke plaat uuesti. Korrake nii palju kaarte kui soovite (vähemalt viis või kuus).
-
Kuivuse vältimiseks sulgege agariplaadid plastikpakendiga. Inkubeerige eoseid vastava liigi temperatuuri ja valgustuse tingimustes.
-
Jälgi märke iga paari päeva tagant, otsides idanemise märke. Valge kohev kasv (mütseel) agari pinnal näitab seene olemasolu (kuid see ei pruugi olla spooridest kasvanud seen).
Seente kasvatamine eostest
Spooride asetamine plaatidele
-
Võrdle mütseeli avaldatud mütseeli kirjeldustega, mida sa tahad kasvatada.
-
Kui mütseel näeb välja ootuspäraselt, puhastage kultuuri tükeldamise teel ja viies need värsketesse agariplaatidesse.
-
Jätkake tükeldamist laienevate kolooniate otsast, kuni puhas koloonia ei sisalda baktereid.
Puhta kultuuri eraldamine
-
Puhastatud mütseeli tükid lõigatakse ja kantakse üle steriliseeritud kiudpurkidesse või puiduhake. Kasutatava substraadi tüüp sõltub seente liigist.
-
Inkubeerige peamisi mütseele selle liigi jaoks sobivates tingimustes, kuni substraat on täielikult koloniseeritud mütsiaga.
-
Raputage mütsia konteinereid regulaarselt, et substraat fragmenteerida ja koloniseerimine kiirendada.
-
Kasutage peamisi mütseele, et inokuleerida teisi mahuteid ja toota rohkem mütseele.
Järglaste ettevalmistamine
-
Raputage mütseemia konteinereid jõuliselt, et neid fragmenteerida.
-
Asetage mütsid seeni või substraatplaatidesse seente kasvatamiseks.
-
Segage mütsiaalid ettevaatlikult substraadiga, segades või segades.
-
Jätkata vastavalt avaldatud meetoditele, kuidas kasvatada mütseeli ja alustada kasvatatavate liikide viljaprotsessi.
Aluspinna inokuleerimine seenekasvuks
Kuidas
- Agari valamisel või nakatamise vähendamisel töötage kiiresti.
- Steriilsete ja eelnevalt valmistatud agariplaatide ostmisega saab säästa aega ja vaeva.
- MEA on hea üldkeskkond seente kasvatamiseks, kuid sõltuvalt liigist võib sobivam olla ka teine söötme tüüp.
Teade
- Survekeetjad võivad kuumeneda ja põhjustada vigastusi. Järgige tootja hooldus- ja kasutusjuhendit.
- Steriliseeritud mahutid on kuumad ja neid tuleb käsitseda kuumakindlate kindadega, et vältida põletusi ja lekkeid.
- Laske konteineri kaaned lahti steriliseerida, et võimaldada rõhu võrdsustamist kuumutamise ja jahutamise ajal.
- Kõik steriliseeritavad mahutid peavad olema valmistatud autoklaavitavast materjalist.
Mida sa vajad
- Seenepoorid
- Linnaseekstrakti agar (MEA)
- Petri tassid (plaadid)
- Substraat sobib liikidele
- Alkoholilamp
- Inokuleerimise konks
- Naatriumkloriidi lahus (0,9 massiprotsenti)
- Survekeetja
- Katsetorud
- Erlenmeyeri kolvid
- Plastkile
- Anumad või kotid mütseemia tootmiseks